一些細胞和組織可在懸浮狀態下生長,但相當一部分哺乳動物細胞需要表面貼壁。
用于提供細胞體外培養環境的培養瓶、培養板和培養皿除了具有良好的透明度和無毒、無菌外,還需經表面改性處理使之能夠貼壁、分裂和生長。
培養瓶和培養皿的區別
培養瓶適合長期培養、傳代、作為種子細胞。
不易污染。
培養皿和培養板適合在各種實驗中選用,臨時培養。
培養面積T25約為25,T75為75。
6孔板、10/孔。
12孔板4/孔。
培養瓶和培養皿的區別在于,安全系數的高低、培養細胞數量的多少。
個人感覺培養瓶的安全系數更高,操作也比較方便。
培養瓶瓶可以用來做相對大規模的培養或比較容易被污染的細胞。
而培養皿比較適合小規模的培養或做一些對照分析實驗。

細胞在細胞培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長,也將細胞數量擴大,就必須進行傳代(再培養)。
傳代培養也是一種將細胞保存下去的方法。
也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。
懸浮性細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。
具體操作步驟如下:
將長滿細胞的細胞培養瓶中原來的培養液棄去。
加入0.5—1ml 0.25%胰酶溶液,使瓶底細胞都浸入溶液中。
瓶口塞好橡皮塞,放在倒置鏡下觀察細胞。
隨著時間的推移,原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時將胰酶棄去,加入10ml培養液終止消化。
觀察消化也可以用肉眼,當見到瓶底發白并出現細針孔空隙時終止消化。
一般室溫消化時間約為1—3分鐘。
用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液,分到兩到三瓶中,實踐培養液塞好橡皮塞,置37℃下繼續培養。
第二天觀察貼壁生長情況。
以上是細胞培養瓶在細胞傳代中的應用,消化液的配制方法如下:稱取0.25克胰酶蛋白酶(活力為1:250),加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,濾器過濾除菌,4℃保存,用前可在37℃下回溫。
胰酶溶液中也可加入EDTA,使終濃度達0.02%。

細胞培養瓶特征
厚度均勻,底部無畸變;
密封蓋/濾膜蓋(0.22μm疏水膜);
設計的瓶蓋可快速旋轉;
側面可疊放,更有效地利用培養箱;
無毒,無DNA/RAN酶;
伽馬射線消毒滅菌。

培養瓶主要分類
按細胞對產品的貼壁要求分為三類:
普通型適合細胞和組織的懸浮培養;
標準型具有良好的細胞貼壁性能,適用于細胞的貼壁生長;
型表面含有含氮官能團,能促進某些細胞(如細胞)的貼壁、生長和分化。
按瓶子外形分為:
寬體培養瓶;
三角培養瓶;
斜頸培養瓶。
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